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                生物顯微鏡的使用小技巧之:覆蓋差

                時間:2023-10-16 13:54:10 來源:本站 點擊:165次

                生物顯微鏡的光學系統也包含蓋玻片以內。因為蓋玻片的薄厚不規范,光線從蓋玻片進到家氣體造成映射后的激光光路發生了更改,進而造成了象差,這就是覆蓋差。覆蓋差的造成危害了光學顯微鏡的成象品質。國際性上要求,生物顯微鏡中蓋玻片的規范薄厚為0.17mm,容許范疇在0.16~0.20mm,在物鏡的生產制造上己將此薄厚范疇的象差測算以內。物鏡機殼標注刻的0.17,就是說明該物鏡規定蓋玻片薄厚。

                生物顯微鏡.png

                因為制做技術性等緣故,生物顯微鏡中蓋玻片薄厚很有可能在0.16下列或0.18之上,因此便會產生覆蓋差。蓋玻片太厚,不應該進到物鏡的光線會進到物鏡;蓋玻片過薄,則應當進到物鏡的光線卻不可以進到。

                生物顯微鏡中變大倍數愈高,NA值愈大,覆蓋差愈顯著,尤以蓋玻片厚,覆蓋差更為嚴重。

                在生物顯微鏡中清除覆蓋差理想化的方法,是用帶校準環的物鏡來調整。這類物鏡常以40times干躁系物鏡。舊式光學顯微鏡可以用更改物鏡長短來調整,蓋玻片過厚,能夠將物鏡減少;過薄,可將物鏡相對變長。但它是消沉的方式,因物鏡長短更改,放大率也隨著更改,另外也危害成象品質。因而不適合科學研究用光學顯微鏡。

                油浸系物鏡不會有覆蓋差難題,它是因為油和蓋玻片的折光率都在1.52上下,因此產生勻稱的光學系統。可是應用油鏡時,生物顯微鏡中蓋玻片太厚,超出了工作中間距,則沒法變焦,乃至看不見圖像。

                有的物境上標著"-"標記,一般為高倍物鏡(0.5times、0.75times、1times、2times),其NA值很低,不會受到蓋玻片的危害,這類物鏡能加也并不加蓋玻片;有的物鏡上標著"0”標記,為不可以加蓋玻片的物鏡,叫“無罩物鏡”。

                生物顯微鏡中物鏡數值孔徑越大,容許蓋玻片薄厚出現偏差的原因的范疇愈小,也表明越是低倍物鏡對蓋玻片薄厚的規定越嚴苛。

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