醫(yī)用顯微鏡形成的圖像要為人眼所感知,醫(yī)用顯微鏡亮度必須有一定明暗差別,也稱襯度。確切說像襯度就是像各部分強(qiáng)度(或光密度)相對于其平均強(qiáng)度(背景)的變化。醫(yī)用顯微鏡薄樣品成像時,未經(jīng)散射的電子是構(gòu)成背景的主要成份,而醫(yī)用顯微鏡襯度決定于樣品各部分對電子的不同散射效果。
醫(yī)用顯微鏡中一般中低放大倍數(shù)的樣品圖像襯度屬于振幅襯度,也稱“散射吸收”襯度。只是此處“吸收”的含意不同于光學(xué)顯微鏡中光被物體吸收所造成的吸收襯度。顯微鏡中形成振幅襯度的基本因素是受樣品彈性散射的電子的多少,或晶體樣品引起的Bragg電子衍射束的隱現(xiàn),后者也是一種彈性散射信號。正如本章開始已指出,彈性散射電子數(shù)隨樣品原子序數(shù)Z和質(zhì)量密度Pt的增加而增加,而且它們主要分布在大散射角O> 10-Zrad的區(qū)域內(nèi)。因此我們可以在顯微鏡物鏡后焦而中插入帶孔光闌,通過選擇孔徑大小來控制被阻擋彈性散射電子的多少,從而在顯微鏡圖像中形成明暗有別的襯度。暗區(qū)對應(yīng)于樣品中的重元素或致密性厚區(qū)(高Z和大Pt值)>u亮區(qū)代表其中的輕元素或薄區(qū)(低Z和小Pt值)。請看圖2-7。把光闌片阻攔電子等效為某種“吸收”,于是就有了“散射吸收”襯度之稱。如果從波動角度來說,這種襯度決定于醫(yī)用顯微鏡像上各處振幅值的差別而與相位無關(guān),故也稱振幅襯度。對于醫(yī)用顯微鏡晶體樣品來說,其衍射束的位置決定于樣品的結(jié)構(gòu)和取向。單晶樣品的衍射電子束在顯微鏡后焦而中將會聚形成點狀、醫(yī)用顯微鏡離散而規(guī)則的排列。